[Campbell Biology P.469] Ein Forscher konstruiert ein rekombinantes Plasmid, indem er ein 1,... | Practice Question

Ein Forscher konstruiert ein rekombinantes Plasmid, indem er ein 1,5 kb großes Gen mithilfe eines einzigen Restriktionsenzyms in ein 3,0 kb großes Plasmid einfügt. Wenn dieses rekombinante Plasmid dann mit dem gleichen Restriktionsenzym geschnitten und mittels Gelelektrophorese analysiert wird, wie viele unterschiedliche DNA-Fragmente würden beobachtet werden und welche ungefähren Größen hätten sie?

  • A: Ein Fragment, 4,5 kb.
  • B: Zwei Fragmente, 1,5 kb und 3,0 kb.
  • C: Zwei Fragmente, 1,5 kb und 4,5 kb.
  • D: Drei Fragmente, 1,5 kb, 3,0 kb und 4,5 kb.

Explanation

Wenn ein zirkuläres Plasmid 3,0 kb ein Gen 1,5 kb mittels eines Restriktionsenzyms eingefügt bekommt, beträgt die Größe des resultierenden rekombinanten Plasmids 4,5 kb 3,0 + 1,5 . Wenn dieses rekombinante Plasmid dann mit dem gleichen Restriktionsenzym geschnitten wird, schneidet das Enzym an den Erkennungsstellen, die das eingefügte Gen flankieren, wodurch das 1,5 kb große Gen effektiv aus dem 3,0 kb großen Plasmid-Backbone herausgeschnitten wird. Dies führt zu zwei unterschiedlichen linearen Fragmenten: einem von 1,5 kb das eingefügte Gen und einem von 3,0 kb das Plasmid-Backbone .