[Campbell Biology P.469] Un chercheur construit un plasmide recombinant en insérant un gène ... | Practice Question

Un chercheur construit un plasmide recombinant en insérant un gène de 1,5 kb dans un plasmide de 3,0 kb à l'aide d'une seule enzyme de restriction. Si ce plasmide recombinant est ensuite coupé avec la même enzyme de restriction et analysé par électrophorèse sur gel, combien de fragments d'ADN distincts seraient observés, et quelles seraient leurs tailles approximatives ?

  • A: Un fragment, 4,5 kb.
  • B: Deux fragments, 1,5 kb et 3,0 kb.
  • C: Deux fragments, 1,5 kb et 4,5 kb.
  • D: Trois fragments, 1,5 kb, 3,0 kb et 4,5 kb.

Explanation

Lorsqu'un plasmide circulaire 3,0 kb contient un gène 1,5 kb inséré à l'aide d'une enzyme de restriction, le plasmide recombinant résultant est de 4,5 kb 3,0 + 1,5 . Si ce plasmide recombinant est ensuite coupé avec la même enzyme de restriction, l'enzyme coupera aux sites de reconnaissance flanquant le gène inséré, excisant ainsi le gène de 1,5 kb de l'échafaudage plasmidique de 3,0 kb. Cela entraînera deux fragments linéaires distincts : un de 1,5 kb le gène inséré et un de 3,0 kb l'échafaudage plasmidique .