[Campbell Biology P.471] Basierend auf Abbildung 20.8 und der dazugehörigen Beschreibung, we... | Practice Question

Basierend auf Abbildung 20.8 und der dazugehörigen Beschreibung, welche der folgenden Sequenzen beschreibt am besten den Prozess der Erzeugung eines rekombinanten DNA-Plasmids und der Auswahl transformierter Wirtszellen?

  • A: DNA-Fragmente (Gen von Interesse) werden gewonnen; Klonierungsvektor wird mit Restriktionsenzym geschnitten; Fragmente und Vektor werden ligiert; rekombinante Plasmide werden zu Wirtszellen hinzugefügt; Zellen werden mit Antibiotikum behandelt.
  • B: Klonierungsvektor wird geschnitten; Wirtszellen werden mit Antibiotikum behandelt; DNA-Fragmente werden gewonnen; Ligation findet statt; rekombinante Plasmide werden den Zellen hinzugefügt.
  • C: Rekombinante Plasmide werden durch Ligation gebildet; DNA-Fragmente werden mittels PCR gewonnen; Klonierungsvektor wird vorbereitet; Wirtszellen werden ausgewählt.
  • D: Klonierungsvektor wird mit DNA-Fragmenten ligiert; Wirtszellen werden mit rekombinanter DNA gemischt; PCR-Primer werden entworfen; Zellen werden auf Antibiotika-Medien kultiviert.

Explanation

Abbildung 20.8 veranschaulicht den Prozess: Zuerst werden PCR-Primer verwendet, um DNA-Fragmente mit Restriktionsstellen zu erhalten. Gleichzeitig wird der Klonierungsvektor mit demselben Restriktionsenzym geschnitten. Dann werden die Fragmente und der Vektor gemischt und ligiert, um rekombinante DNA-Plasmide zu bilden. Diese Plasmide werden zu bakteriellen Wirtszellen hinzugefügt, und schließlich werden die Zellen mit einem Antibiotikum behandelt. Nur Zellen, die das Plasmid das ein Antibiotika-Resistenzgen enthält aufgenommen haben, überleben, was einen Selektionsmechanismus darstellt.