[坎贝尔生物学 第471页练习题] 図20.8とそれに付随する説明に基づき、組換えDNAプラスミドを作成し、形質転換された宿主細胞を選択するプロセスの最良のシーケンスは次...

図20.8とそれに付随する説明に基づき、組換えDNAプラスミドを作成し、形質転換された宿主細胞を選択するプロセスの最良のシーケンスは次のうちどれですか?

  • A: DNA断片(目的遺伝子)を取得する;制限酵素でクローニングベクターを切断する;断片とベクターを連結する;組換えプラスミドを宿主細胞に加える;細胞を抗生物質で処理する。
  • B: クローニングベクターを切断する;宿主細胞を抗生物質で処理する;DNA断片を取得する;連結が起こる;組換えプラスミドを細胞に加える。
  • C: 連結によって組換えプラスミドが形成される;PCRを用いてDNA断片を取得する;クローニングベクターを準備する;宿主細胞を選択する。
  • D: クローニングベクターをDNA断片と連結する;宿主細胞を組換えDNAと混合する;PCRプライマーを設計する;細胞を抗生物質培地で培養する。

Explanation

図20.8はプロセスを示しています:まず、PCRプライマーを用いて制限部位を持つDNA断片を取得します。同時に、クローニングベクターも同じ制限酵素で切断します。次に、断片とベクターを混合して連結し、組換えDNAプラスミドを形成します。これらのプラスミドは細菌宿主細胞に加えられ、最後に細胞は抗生物質で処理されます。プラスミド(抗生物質耐性遺伝子を含む)を取り込んだ細胞のみが生き残り、選択メカニズムを提供します。