[坎贝尔生物学 第471页练习题] 根据图 20.8 及其附带的描述,以下哪个序列最能描述创建重组 DNA 质粒并选择转化宿主细胞的过程?

根据图 20.8 及其附带的描述,以下哪个序列最能描述创建重组 DNA 质粒并选择转化宿主细胞的过程?

  • A: 获得 DNA 片段(目的基因);用限制酶切割克隆载体;片段和载体连接;重组质粒加入宿主细胞;细胞用抗生素处理。
  • B: 切割克隆载体;宿主细胞用抗生素处理;获得 DNA 片段;发生连接;重组质粒加入细胞。
  • C: 通过连接形成重组质粒;用 PCR 获得 DNA 片段;准备克隆载体;选择宿主细胞。
  • D: 克隆载体与 DNA 片段连接;宿主细胞与重组 DNA 混合;设计 PCR 引物;细胞在抗生素培养基上生长。

Explanation

图 20.8 阐述了这一过程:首先,使用 PCR 引物获得带有限制性位点的 DNA 片段。同时,克隆载体也用相同的限制酶切割。然后,将片段和载体混合并连接,形成重组 DNA 质粒。这些质粒被添加到细菌宿主细胞中,最后,细胞用抗生素处理。只有那些摄取了质粒(含有抗生素抗性基因)的细胞才能存活,从而提供了一个筛选机制。